传说用耶稣在最后的晚餐中用到的圣杯喝水,便能长生不老。在一次掘金活动中,记载圣杯的碑石被发现,圣杯存在的可能吸引着大批的疯狂的人展开寻找。印第安纳琼斯博士(哈里森·福特饰)也是他们中的一员,甚至连他的父亲老琼斯(肖恩·康纳利饰)也陷入其中——但他给琼斯留下圣杯的笔记后便不知所踪。踏上威尼斯的土地,琼斯和事先约好的史奈达博士(艾利森·杜迪饰)会面,他们在图书馆里凭线索找到圣盾后,却开始遭到莫名的来自十字剑兄弟的追杀。一番波折后,琼斯终于找到了老琼斯,同时,史奈达的纳粹身份暴露,笔记被抢走。圣杯随时都有可能落入纳粹的手中。于是,琼斯父子俩开始联袂上演拯救圣杯的精彩大戏!
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